Actualizado 13 junio 2024
Definición
El Western Blot (WB) es un método electroforético capaz de detectar una reacción antígeno-anticuerpo en su etapa final.
Introducción
El virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) es un retrovirus esférico con material genético de ARN monocatenario, perteneciente al género Lentivirinae, familia Retroviridae. Se une e infecta preferentemente a los linfocitos T CD4 (helper), disminuyendo lenta y progresivamente sus niveles.
La infección aguda puede manifestarse como un síndrome similar a la mononucleosis (aproximadamente en la mitad de los individuos) o evolucionar de manera oligo/asintomática. Con el paso de los años (unos 10 años después de la infección primaria, en promedio), pueden ocurrir infecciones oportunistas y neoplasias malignas secundarias, lo que lleva a una etapa de infección conocida como SIDA (síndrome de inmunodeficiencia adquirida).
Existen dos tipos distintos pero estrechamente relacionados del virus, con alrededor del 40% de material genético homólogo: VIH-1 (distribuido en todo el mundo) y VIH-2 (que se encuentra principalmente en África), ambos agentes etiológicos del SIDA. La infección por VIH-2 induce una condición/enfermedad similar a la causada por el VIH-1, aunque el tiempo promedio de incubación para el desarrollo del SIDA parece ser más largo.
En el genoma viral existen tres genes principales responsables de codificar las proteínas estructurales y enzimas virales más importantes: Los genes gag, pol y env.
En la técnica Western Blot, las proteínas virales (antígenos) se separan mediante bandas sobre papel de nitrocelulosa, que se incuban con el suero del paciente. Cada banda corresponde a un producto genético/antígeno específico: Gen gag (p17, p24 y p55), gen pol (p31, p51 y p66) y gen env (gp41, gp120 y gp160).
Un Western Blot (WB) se considera positivo cuando se detectan al menos 2 de estas 3 bandas (p24, p41 o gp120/160). Se informa un resultado indeterminado cuando la detección de cualquier banda o conjunto de bandas es diferente de los criterios de positividad anteriores. Un WB se considera negativo cuando no hay ninguna banda presente.
Solicitud
Indicaciones:
- Prueba confirmatoria o complementaria de VIH, después de una prueba de detección reactiva, en algunos diagramas de flujo.
- Diferenciar la infección por VIH-1 y VIH-2.
- En situaciones donde el inmunoensayo es reactivo, pero la carga viral es inferior a 5.000 copias/ml.
- Confirmación diagnóstica en pacientes «controladores de élite».
Cómo solicitar: VIH – Western Blot.
Orientación para la toma de la muestra
- No es necesaria ninguna preparación específica por parte del paciente.
- Tubo para suero: (tapa roja/amarilla). Mantener el material bajo refrigeración (2 a 8 °C).
- Material: Sangre.
- Volumen recomendable: 2.0 mL.
Valores de referencia
- Muestra no reactiva para VIH.
Limitaciones
- Pueden producirse resultados falsos reactivos (entre 1% y 2%) y resultados falsos no reactivos (en proporciones no muy bien establecidas), lo cual es una característica del método.
- En una proporción considerable de pacientes se pueden informar resultados indeterminados (ni reactivos, ni no reactivos).
- Es una prueba menos sensible que los inmunoensayos de tercera y cuarta generación y puede generar una mayor proporción de resultados falsos no reactivos. Por lo tanto, no se recomiendan para detectar o identificar infecciones recientes.
- Existe un desfase temporal entre la exposición del paciente y la detección del virus («ventana de diagnóstico»), respecto del cual ninguna prueba disponible actualmente puede definir de forma concluyente el resultado de la muestra.
- Los resultados no reactivos no excluyen definitivamente la posibilidad de una infección aguda por VIH.
- Pueden producirse resultados falsos reactivos, falsos no reactivos, indeterminados, no concluyentes o discrepantes entre diferentes tipos de pruebas o metodologías.
Causas de alteracion
- No aplica.
(Ver – VIH – Carga viral)
Referencias bibliográficas
McPherson RA, Pincus MR. Henry’s Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods. 23rd ed. St. Louis, MO: Elsevier, 2017.
Ministry of Health (BR). Department of Health Surveillance. Department of Surveillance, Prevention and Control of Sexually Transmitted Infections, HIV/AIDS and Viral Hepatitis. Technical Manual for the Diagnosis of HIV Infection in Adults and Children. Brasília: Ministry of Health, 2018.
Ministry of Health (BR). Department of Chronic Conditions Diseases and Sexually Transmitted Infections. Ordinance No. 29, of December 17, 2013. Brasília: Ministry of Health, 2013.
Jacobs DS, DeMott WR, Oxley DK. Jacobs & DeMott Laboratory Test Handbook with Key Word Index. 5th edition. Hudson, OH: Lexi-Comp Inc, 2001.
Sugerencias y comentarios al correo: contacto@galenbook.com